精準檢測，洞悉生命 - 上海心語生物科技有限公司

（心語檢測(XinYu BioDetect），您的可靠科研伙伴

ELISA試劑盒的典型組成：

一個標準的ELISA試劑盒通常包含以下組件：

1、預包被微孔板： 96孔或48孔塑料板，孔內已預先包被好捕獲抗體或抗原（根據類型而定）。這是反應發生的場所。

2、酶標二抗（或酶標檢測抗體/抗原）： 根據ELISA類型，提供辣根過氧化物酶或堿性磷酸酶標記的二抗（用于間接法或夾心法），或酶標抗原（用于競爭法）。

3、標準品： 已知精確濃度的抗原（或抗體）系列梯度溶液。用于繪制標準曲線，計算樣本中待測物的濃度。

4、檢測抗體（僅夾心法）： 未標記的、針對抗原另一表位的抗體。

5、樣品稀釋液： 用于稀釋樣本，使其基質與標準品和緩沖體系匹配，減少非特異性干擾。

6、洗滌緩沖液： 通常為含吐溫-20的磷酸鹽緩沖液。用于在各步驟之間洗去未結合的物質，減少背景干擾。洗滌是否是實驗成敗的關鍵！

7、封閉液： 常用牛血清白蛋白或脫脂奶粉溶液。用于在包被后封閉微孔板上未結合的位點，防止后續步驟中的非特異性吸附，降低背景。

8、底物溶液：

對于HRP：常用四甲基聯苯胺或3,3',5,5'-四甲基聯苯胺。

對于AP：常用對硝基苯磷酸酯。

9、終止液：

對于HRP-TMB：常用稀硫酸溶液。

對于AP-pNPP：常用氫氧化鈉溶液。用于終止酶促反應，穩定最終顏色。

10、板封膜： 在孵育步驟中覆蓋微孔板，防止蒸發和污染。

11、說明書： 詳細的操作步驟、試劑保存條件、注意事項、預期結果和標準曲線繪制方法等。

樣本處理及要求：

1. 血清：將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過夜，然后1000×g離心20 分鐘，取上清即可，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。

2. 血漿：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本，并將標本在采集后的30分鐘內于2-8℃ 1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。

3. 組織勻漿：用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果），稱重后將組織,剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對應9mL的PBS，具體體積可根據實驗需要適當調整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞，可以對勻漿液進行超聲破碎，或反復凍融。最后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測。

4. 細胞培養物上清：請1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。

5. 其它生物標本：1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測。

6. 樣品外觀：樣品應清澈透明，懸浮物應離心去除。

7. 樣品保存：樣品收集后若在1周內進行檢測的可保存于4℃，若不能及時檢測，請按一次使用量分裝，凍存于-20℃（1個月內檢測），或-80℃（6個月內檢測），避免反復凍融，標本溶血會影響最后檢測結果，因此溶血標本不宜進行此項檢測。

人血管性血友病因子ELISA試劑盒相關產品：

心語檢測(XinYu BioDetect)   人肺特異性X蛋白(LUNX)ELISA試劑盒   英文名：LUNX

心語檢測(XinYu BioDetect)   人肺炎支原體IgG抗體(MP-IgG)ELISA試劑盒   英文名：MP-IgG

心語檢測(XinYu BioDetect)   人踝蛋白(talin)ELISA試劑盒   英文名：talin

心語檢測(XinYu BioDetect)   人肺炎支原體(MP)ELISA試劑盒   英文名：MP

心語檢測(XinYu BioDetect)   人跨膜蛋白97(TMEM97；MAC30)ELISA試劑盒   英文名：TMEM97；MAC30

心語檢測(XinYu BioDetect)   人肥胖抑制素(obestatin)ELISA試劑盒   英文名：obestatin

心語檢測(XinYu BioDetect)   人跨膜受體蛋白Notch-1(NOTCH1)ELISA試劑盒   英文名：NOTCH1

心語檢測(XinYu BioDetect)   人肥素(FTO)ELISA試劑盒   英文名：FTO

心語檢測(XinYu BioDetect)   人跨膜受體蛋白Notch-1(Notch-1)ELISA試劑盒   英文名：Notch-1

心語檢測(XinYu BioDetect)   人肥大細胞羧肽酶(MC-CPA)ELISA試劑盒   英文名：MC-CPA

心語檢測(XinYu BioDetect)   人足細胞標記蛋白;足盂蛋白(PCX)ELISA試劑盒   英文名：PCX

心語檢測(XinYu BioDetect)   人足細胞B7-1(B7-1)ELISA試劑盒   英文名：B7-1

心語檢測(XinYu BioDetect)   人肥大細胞生長因子 (MGF)ELISA試劑盒   英文名：MGF

心語檢測(XinYu BioDetect)   人趨化素樣因子1(CKLF1)ELISA試劑盒   英文名：CKLF1

心語檢測(XinYu BioDetect)   人趨化素(chemerin)ELISA試劑盒   英文名：chemerin

心語檢測(XinYu BioDetect)   人腸脂肪酸結合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒   英文名：iFABP

心語檢測(XinYu BioDetect)   人腸三葉因子(ITF)ELISA試劑盒   英文名：ITF

心語檢測(XinYu BioDetect)   人肝配蛋白B3(ephrin-B3)ELISA試劑盒   英文名：ephrin-B3

心語檢測(XinYu BioDetect)   人肝配蛋白A受體1(EPHA1)ELISA試劑盒   英文名：EPHA1

心語檢測(XinYu BioDetect)   人肝配蛋白A1(EFNA1)ELISA試劑盒   英文名：EFNA1

心語檢測(XinYu BioDetect)   人肝臟甘油三脂脂肪酶(HTGL)ELISA試劑盒   英文名：HTGL

心語檢測(XinYu BioDetect)   人趨化樣因子受體1抗體(CMKLR1Ab)ELISA試劑盒   英文名：CMKLR1Ab